Grand-duc de Toscane
Florence 1549 - 1609

Second fils de Cosme I, abandonna sa robe de cardinal pour monter sur le tròne après la mort de son frère François I, qui n'avait pas de fils héritier. Il gouverna avec une grande assurance, redonnant du souffle au commerce et à l'industrie mais surtout à l'agriculture, à travers de grands travaux d'assainissement dans le Val di Chiana, Maremma et le Val de Nievole.

Il s'opposa au municipalisme florentin en créant le port franc de Livourne, fondée comme ville en 1557 par François I selon un plan d'aménagement de Buontalenti. Il y promut la formation d'une flotte de guerre efficace qui défit à plusieurs reprises les flottes turques (Famagosta 1608, Bona 1609). Ses exploits militaires furent peints en fresques par Bernardino Poccetti dans la Sala di Bona du Palais Pitti.
Afin de surveiller le pouvoir espagnol, il s'allia à la France en épousant Christine de Lorraine, de qui il eut huit enfants et en soutenant Henri IV à qui il parvint à donner comme épouse sa nièce Marie, fille de son frère François. Il se rapprocha de l'Espagne après la perte de Saluzzese et organisa le mariage de son fils aîné Cosme avec l'archiduchesse Marie Madeleine d'Autriche, soeur de l'Empereur.
Tout comme ancêtres, il fut protecteur des Arts: il confia à Buontalenti la construction de la Forteresse del Belvedere, véritable coffre fort de la famille, et à Giambologna la statue de Cosme I située sur la piazza Signoria e ainsi que les villas de Artimino et de Ambrogiana, et enfin en 1604, il autorisa la contruction de la Chapelle des Médicis à St Laurent. Il protégea l'historien Scipione Ammirato, et dans le domaine de la musique, la Camerata dei Bardi qui, de par son mélodrammatique, aurait ouvert la voie aux grandes traditions de l'opéra lyrique italien.